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實(shí)驗室設計
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PCR實(shí)驗室設計標準及規范

作者:科藝普實(shí)驗室設計集團 來(lái)源:www.whcxjj.com 時(shí)間:2022-07-14 11:29:49 閱讀:479次

[導讀]:PCR實(shí)驗室通常采用非單向流送風(fēng)方式,所謂非單向流,指氣流流線(xiàn)方向不平行,風(fēng)速也不一致。非單向流的氣流組織方式有上送下回式、上送下側回式、測送下回式、上送上回式、PCR實(shí)驗室一般采用上送下回式。上部送風(fēng)依靠高效送風(fēng)口進(jìn)入房間,下部回風(fēng)依靠每個(gè)房間的對稱(chēng)分布的排風(fēng)柱下部的排風(fēng)口排風(fēng)。

 PCR實(shí)驗室通常采用非單向流送風(fēng)方式,所謂非單向流,指氣流流線(xiàn)方向不平行,風(fēng)速也不一致。非單向流的氣流組織方式有上送下回式、上送下側回式、測送下回式、上送上回式、PCR實(shí)驗室一般采用上送下回式。上部送風(fēng)依靠高效送風(fēng)口進(jìn)入房間,下部回風(fēng)依靠每個(gè)房間的對稱(chēng)分布的排風(fēng)柱下部的排風(fēng)口排風(fēng)。

 目前PCR應用已得到長(cháng)足的發(fā)展,已成為疫病診斷,疫情控制等方面的有力工具,為了避免在PCR方法中出現污染及出現假陽(yáng)性和假陰性結果等現象,保證結果的準確性,在實(shí)驗室環(huán)境安全控制上嚴格做到實(shí)驗室獨立區域設計,功能分區明確,保證實(shí)驗室潔凈環(huán)境,人流物流嚴格分流,設計合理的壓力梯度,形成有序的氣流組織方向,切實(shí)做到避免交叉污染。

 PCR是聚合酶鏈式反應(PolymeraseChainReaction)的簡(jiǎn)稱(chēng),是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復制。

 避免污染是PCR實(shí)驗室設計建設首要考慮重點(diǎn)

 由于PCR技術(shù)的高度敏感性,PCR技術(shù)要求高、影響因素多,從樣品制備到結果的產(chǎn)生,任何一處細微的失誤均會(huì )造成結果的偏差,導致樣品的假陽(yáng)性和假陰性結果。

 PCR實(shí)驗室研究過(guò)程中,很多操作都會(huì )產(chǎn)生氣溶膠,比如離心、混勻等操作閔。為保證環(huán)境安全,PCR實(shí)驗室設計建設需獨立區域設計,避免與其余環(huán)境的交叉混雜,下面SICOLAB根據我們做過(guò)的工程實(shí)例從平面布局、凈化區域劃分,人物流設計和壓差控制等方面具體介紹。

 一丶PCR實(shí)驗室區域劃分

 1、功能劃分

 試劑準備區、標本制備區、擴增反應一區、純化區、擴增反應二區、后純化區(如上布局圖)。

 2、SICOLAB設計原則

 按國家衛生部的要求,各實(shí)驗區域必須是相互獨立的,不能直通,每個(gè)獨立實(shí)驗區設有專(zhuān)門(mén)的閘間供工作人員換工作服和鞋,進(jìn)入各工作區域必須嚴格遵循單一方向順序,即只能從左邊試劑準備區,標本制備區,擴增反應一區,純化區,擴增反應二區到后純化區,避免發(fā)生交叉污染。

 3、為避免樣本間的交叉污染,房間采取凈化控制,總體設計為10萬(wàn)級。閘間(緩沖間)設計為正壓區,保證與外界環(huán)境隔離,避免從鄰近區域進(jìn)入本區域的氣溶膠污染。

 二、氣流設計

 人流物流設計各行其道,避免交叉混雜,整個(gè)區域設計一個(gè)公用走廊,工作區域之間設計試劑物品傳遞專(zhuān)用窗,做到人物分流。

 1、物流:在試劑準備區與標本制備區、標本制備區與PCR擴增區之間,以及擴增區域和純化區之間設計有電子連鎖不銹鋼傳遞窗,以單向進(jìn)行試劑、標本等物品傳送,配制的試劑通過(guò)單向傳遞窗由試劑準備區傳遞到標本制備區,處理過(guò)的標本通過(guò)單向傳遞窗由標本制備區傳遞到PCR擴增區,按照工藝流程逐次傳遞,避免返流。單向物品傳送系統既保障了標本試劑不受污染,又保障了標本試劑不污染環(huán)境。

 2、人流:人員通過(guò)閘間分別進(jìn)入各自實(shí)驗區域,進(jìn)出各實(shí)驗區域需要在閘間區域更換潔凈工作服,手消毒等。

 三、壓差設計

 PCR實(shí)驗室應設計為負壓潔凈室,通過(guò)壓差控制,使整個(gè)PCR實(shí)驗過(guò)程中試劑和標本免受氣溶膠的污染,并且降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。

 各個(gè)實(shí)驗室與非潔凈區之間的閘間保持正壓,>10Pa,實(shí)驗與閘間之間的氣流組織方向為:試劑準備區空氣流向閘間,標本制備區流向閘間,而PCR擴增區氣流方向由閘間流向PCR擴增區,純化區同理;

 同時(shí)按照試劑單向流方向,各個(gè)實(shí)驗室之間設計不同壓力梯度來(lái)實(shí)現單向氣流組織方向,由試劑準備區(+20Pa)、標本制備區(+15Pa)、擴增反應一區(-5Pa)、純化區(-10Pa)、擴增反應二區(-20Pa)、到后純化區(-25Pa)壓力逐漸降低,形成單向負壓壓力梯度。

 四、其它安全設施

 PCR實(shí)驗室為潔凈空調系統,系統形式采用直流系統不回風(fēng),防止交叉污染;試劑準備間設計超凈臺,保證試劑免受空氣環(huán)境污染;標本制備間設計生物安全柜,保證標本不污染室內環(huán)境,并保證標本免受環(huán)境污染。

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